2026年4月15日，由中國醫(yī)學(xué)裝備協(xié)會基因檢測分會、醫(yī)療輔助技術(shù)（醫(yī)學(xué)檢驗）國家臨床醫(yī)學(xué)研究中心、中華醫(yī)學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)分會臨床微生物學(xué)組聯(lián)合制定的 《宏基因組高通量測序技術(shù)臨床實驗室規(guī)范化應(yīng)用指南（2026版）》 正式發(fā)布。
這是繼2020—2025年多部mNGS相關(guān)共識之后，首部系統(tǒng)覆蓋 “濕實驗+干實驗”全流程、以實驗室規(guī)范化建設(shè)為核心的指南性文件，標(biāo)志著我國mNGS臨床檢測從“能用”向“規(guī)范用”室之間的結(jié)果差異大，臨床解讀困難重重?！凹夹g(shù)越強，規(guī)范越急”。此次指南的出臺，正是為了解決實驗室在環(huán)境分區(qū)、人員資質(zhì)、試劑耗材、軟件數(shù)據(jù)庫、質(zhì)控體系、性能確認(rèn)、結(jié)果判讀**等方面的現(xiàn)實痛點。
指南圍繞15個關(guān)鍵問題，形成15條推薦意見（其中14條為“建議”，1條為“考慮”），以下為IVD從業(yè)者最應(yīng)關(guān)注的內(nèi)容： 1. 明確預(yù)期用途（推薦意見1） 實驗室開展的mNGS檢測項目需有明確的臨床預(yù)期用途，包括疾病類型/癥候群、標(biāo)本類型、適用人群、檢測核酸類型（DNA/RNA）及臨床意義。 解讀：不能“為了測而測”，每項mNGS產(chǎn)品/方法必須有清晰的臨床定位。 2. 實驗室分區(qū)與流向（推薦意見2） 應(yīng)設(shè)置試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、文庫制備區(qū)、文庫擴增區(qū)（如適用）、測序區(qū)，單一流向。 血液/腦脊液等無菌標(biāo)本與下呼吸道等有菌標(biāo)本的提取應(yīng)在不同區(qū)域或不同批次。 不推薦與常規(guī)PCR共用區(qū)域；如確需共用，必須按mNGS標(biāo)準(zhǔn)管理。 解讀：污染是mNGS的頭號敵人，分區(qū)和流向是硬性門檻。 3. 人員資質(zhì)（推薦意見3） 人員必須通過省級以上指定機構(gòu)組織的基因擴增檢驗技術(shù)培訓(xùn)，并通過內(nèi)部制度化培訓(xùn)考核。 解讀：mNGS不是普通PCR，人員能力要求更高，培訓(xùn)必須“雙保險”。 4. 儀器設(shè)備（推薦意見4） 新測序儀安裝后需進行安裝確認(rèn)，更換儀器后需用已知樣本平行檢測，結(jié)果一致方可使用。每次實驗后必須有儀器清潔程序。 解讀：測序儀的“身份證”和“體檢報告”缺一不可。 5. 試劑、耗材、軟件、數(shù)據(jù)庫（推薦意見5） 每批次試劑必須進行背景微生物確認(rèn)。 耗材需有控菌措施（如高壓滅菌、濾芯吸頭）。 軟件更新后必須用至少3個舊數(shù)據(jù)重新驗證。 數(shù)據(jù)庫原則上非必要不更新；若更新，必須用至少10個舊數(shù)據(jù)驗證，覆蓋細(xì)菌、真菌、DNA/RNA病毒、寄生蟲。 解讀：數(shù)據(jù)庫一換，結(jié)果天差地別——這是很多實驗室忽視的“隱形炸彈”。 6. 標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（SOPs）（推薦意見6） 應(yīng)建立與常規(guī)方法（培養(yǎng)、PCR、快速檢測、血清學(xué)）相結(jié)合的臨床檢驗路徑，明確何時啟動mNGS。SOPs須覆蓋分析前、中、后全流程，包括cut-off值建立。 解讀：mNGS不是“萬能替代”，而是“補充精裝”——先用常規(guī)，再上mNGS，這是臨床落地的最佳實踐。 7. 標(biāo)本采集、運輸、接收、保存（推薦意見7） 必須在潔凈區(qū)域采集，使用無菌、去核酸的采集管，采集后立即密封、一次性封裝。實驗室須建立標(biāo)本質(zhì)檢程序，不合格標(biāo)本需明確處理流程（拒收、重采或讓步檢測）。 解讀：標(biāo)本質(zhì)量決定結(jié)果質(zhì)量，很多假陰性源于采集運輸環(huán)節(jié)的“坑”。 8. “濕實驗”流程（推薦意見8） 須監(jiān)測核酸提取濃度、文庫濃度、測序數(shù)據(jù)量、Q30等關(guān)鍵質(zhì)量值。 解讀：不能只看最終有沒有病原體，中間每一步的“質(zhì)量值”才是可控性的體現(xiàn)。 9. “干實驗”流程（推薦意見9） 必須建立覆蓋原始數(shù)據(jù)質(zhì)控→宿主序列過濾→物種注釋的SOPs，明確軟件版本、參數(shù)、數(shù)據(jù)庫版本及質(zhì)量值要求（如過濾后有效數(shù)據(jù)量、非宿主數(shù)據(jù)占比等）。 解讀：生信不是“黑箱”，每一步都必須可追溯、可質(zhì)控。 10. 結(jié)果判讀：陽性判斷值與背景數(shù)據(jù)庫（推薦意見10） 必須使用具有陽性判斷值（cut-off值）的mNGS方法，可通過ROC曲線建立。同時必須建立背景微生物數(shù)據(jù)庫（涵蓋試劑、環(huán)境、耗材），用于排除外源污染導(dǎo)致的假陽性。結(jié)果判讀原則：先按cut-off判陰陽，再排除背景污染，最后給出最終結(jié)果。 解讀：沒有cut-off的mNGS就是“耍流氓”；不建背景庫，假陽性滿天飛。 11. 參考物質(zhì)（推薦意見11） 臨床標(biāo)本難以大量獲得時，可使用模擬樣本（含人源核酸+病原體核酸，基質(zhì)與臨床一致）。干實驗可采用計算機模擬數(shù)據(jù)。 解讀：參考物質(zhì)是性能確認(rèn)、質(zhì)控、室間質(zhì)評的“標(biāo)尺”，不能隨意湊合。 12. 性能確認(rèn)（推薦意見12） 對每一類病原體（DNA病毒、RNA病毒、革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、真菌、寄生蟲）選擇代表性菌株，驗證精密度（重復(fù)性+重現(xiàn)性）、分析靈敏度（LoD）、分析特異性、準(zhǔn)確度、交叉污染。 三種可簡化情形： mNGS僅作為補充檢測； 曾做過完整性能確認(rèn)（僅修改cut-off需重做）； 陽性結(jié)果均采用另一種方法（NMPA批準(zhǔn)試劑或經(jīng)過驗證的自建方法）確認(rèn)。 解讀：性能確認(rèn)是合規(guī)的“入場券”，但指南給出了靈活通道，避免過度“內(nèi)卷”。 13. 室內(nèi)質(zhì)量控制（推薦意見13） 陽性質(zhì)控品：每批檢測弱陽性（1.5~3倍LoD），覆蓋多類病原體。 陰性質(zhì)控品：監(jiān)測外源污染，失控需分析原因。 內(nèi)參：每個標(biāo)本加外源性內(nèi)參，監(jiān)測檢測有效性。 標(biāo)簽（UDI）：監(jiān)測交叉污染。 定期進行擦拭實驗（Swipe tests）監(jiān)測實驗室表面污染。 解讀：質(zhì)控不是“做樣子”，內(nèi)參+陰陽性對照+標(biāo)簽+環(huán)境擦拭，四重防線。 14. 室間質(zhì)量評價（推薦意見14） 定期參加EQA/PT；如無，與至少兩家外部實驗室進行比對。 解讀：閉門造車不可取，EQA是發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)性問題的“照妖鏡”。 15. 結(jié)果報告與解釋（推薦意見15） 報告至少包含：患者信息、標(biāo)本信息、檢測信息、實驗室信息、結(jié)果信息（病原體名稱、豐度參數(shù)如RPM、耐藥基因如適用）。不推薦常規(guī)報告測序深度等過程參數(shù)。結(jié)果解釋必須結(jié)合臨床，陰性不能排除感染，耐藥基因需謹(jǐn)慎解讀。 解讀：報告不是數(shù)據(jù)堆砌，要讓臨床醫(yī)生看得懂、用得上。 ※指南的行業(yè)意義 1. 填補了“實驗室規(guī)范化”的空白：以往共識多聚焦臨床應(yīng)用，這次聚焦實驗室自身建設(shè)，直擊“操作不規(guī)范、結(jié)果不可靠”的痛點。 2. 強調(diào)污染控制與背景數(shù)據(jù)庫：首次明確提出每批次試劑背景確認(rèn)、定期擦拭實驗、建立本地背景微生物庫，這是mNGS質(zhì)量保證的“生命線”。 3. 性能確認(rèn)給出簡化路徑：避免了“一刀切”式的過度驗證，尤其利好開展補充檢測或已有完整驗證的實驗室。 4. 結(jié)果判讀回歸臨床：cut-off+背景庫+臨床溝通，三管齊下，減少“假陽性恐慌”和“假陰性漏診”。 ※對IVD企業(yè)的影響 試劑盒開發(fā)：必須配套明確cut-off值和背景數(shù)據(jù)庫建立方法，不能只賣“通用方案”。 自動化儀器：交叉污染驗證（強陽性+陰性交叉模式，連續(xù)5批）成為標(biāo)配。 生信軟件：更新驗證要求提高，數(shù)據(jù)庫版本管理成為監(jiān)管重點。 參考物質(zhì)：模擬樣本市場需求將顯著增長，特別是含人源背景、片段化cfDNA模擬血漿等。 ※結(jié)語 2026版mNGS規(guī)范化指南，是國內(nèi)感染病原宏基因組檢測領(lǐng)域從“野蠻生長”走向“精耕細(xì)作”的重要里程碑。對于IVD從業(yè)者而言，這既是一次合規(guī)挑戰(zhàn)，也是一次能力分化的機遇。 聲明：本文所用視頻、圖片、文字部分來源于互聯(lián)網(wǎng)，版權(quán)屬原作者所有。如涉及到版權(quán)問題，請及時和我們聯(lián)系，核實后協(xié)商處理或刪除。
